ELISA試劑盒的基本檢測原理簡(jiǎn)介
瀏覽次數:617發(fā)布日期:2020-08-13
ELISA試劑盒應用定性?shī)A心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì )與HEV的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結合物就會(huì )與頭一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在三次孵育時(shí)會(huì )發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會(huì )發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長(cháng)450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準細胞株,O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽(yáng)性。
ELISA試劑盒的臨床測定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展,而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標記物的應用。目前,分子生物學(xué)正在并終肯定會(huì )讓我們對整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認識,其對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的,它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質(zhì)的測定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。