公司采用全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無(wú)效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱(chēng):豬主要急性期蛋白ELISA試劑盒
英文名稱(chēng): MAP ELISA Kit
規格 :48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..
標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過(guò)夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱(chēng)重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過(guò)程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照國家標準進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號,只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會(huì )有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時(shí),可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時(shí)間過(guò)長(cháng)或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時(shí)采用無(wú)菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過(guò)久,檢測時(shí)盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
以下是豬主要急性期蛋白ELISA試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
沙氏葡萄糖瓊脂培養基大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試盒
沙氏葡萄糖肉湯培養基大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試盒
沙氏液體培養基大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試盒
沙氏瓊脂培養基大鼠維生素K1(VK1)ELISA試盒
霉菌液體培養基大鼠維生素E(VE)ELISA試盒
馬鈴薯瓊脂大鼠維生素D3(VD3)ELISA試盒
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)大鼠維生素D2(VD2)ELISA試盒
改良馬瓊脂培養基(真菌營(yíng)養瓊脂培養基)大鼠維生素D(VD)ELISA試盒
改良馬培養基 (真菌培養基)大鼠維生素C(VC)ELISA試盒
高鹽察氏培養基大鼠維生素B6(VB6)ELISA試盒
察氏培養基大鼠維生素B12(VB12)ELISA試盒
玫瑰紅鈉瓊脂培養基大鼠維生素A(VA)ELISA試盒
孟加拉紅培養基(虎紅瓊脂)大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試盒
Terrific Broth大鼠內臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制(vaspin)ELISA試盒
去氧膽酸鹽瓊脂大鼠遲現抗原(VLA)ELISA試盒布氏肉湯ELISA Kit for Human Alpha-crystallin B chain
半固體布氏肉湯(含0.18%瓊脂)人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試盒
豬主要急性期蛋白ELISA試劑盒布氏瓊脂ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(IV) chain
改良Skirrow氏瓊脂基礎人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試盒
山梨醇麥康凱瓊脂基礎ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(III) chain
改良Camp-BAP瓊脂基礎人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試盒
TTC瓊脂基礎ELISA Kit for Human Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5
甘氨酸培養基人趨化因子C-C-基元配體16ELISA試盒
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 16
碳酸鈉瓊脂基礎人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試盒
指示選擇性培養基基礎ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 5
PLET瓊脂基礎人XXVII型膠原(COLXXVII)ELISA試盒
快速硫化試驗瓊脂ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(XXVIII) chain
DNA酶基綠瓊脂基礎人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試盒
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(MYP)ELISA Kit for Human CD40 ligand
ELISA 試驗時(shí),注意事項如下:
1. 正式試驗時(shí),應分別以陽(yáng)性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實(shí)驗結果的準確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
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